在植物组培生产中， 如何减少试管苗的污染和提高过渡苗的成活率，进而降低生产成本， 提高产品的质量和数量，以获得良好的经济效益，一直是亟待解决的问题。
无糖组织培养技术与传统的组培技术相比，其特点是培养基中不加糖，采用环境控制手段，增加组培苗培养过程中的光照和CO2，促使植株加强自身的光合作用，由异养型向自养型转变，从而降低污染率，提高过渡苗的成活率以及商品苗的质量和产量，更利于植物组培的工厂化、规模化生产。
1 材料和方法
供试材料为非洲菊 (Gerbera janes on ii Bolus) 组培苗。
培养基为：(a) MS+0.1mgNAA+30g蔗糖； (b) MS(不加激素、维生素、有机物、糖) ； (c)Hoagland(无糖) 。pH均为5.8。
封口膜通气孔分为：0孔(没有通气孔) 、2孔和4孔。通气孔滤膜直径 10mm， 滤膜微孔0.5Pm。
光照和CO2处理为：2800lx(不加CO2) 、8000lx+CO2(3920mg/m³) 。
试验处理数为：3(培养基)×3(封口膜)×2(光照)=18。每处理7瓶，共计126瓶。每瓶装入培养基35~40mL(瓶子容积为250mL)。每瓶接种5株试验苗。放在光照强度2800lx的培养架上培养、光照时间均为12h，温度(23±1)℃。0~3d用膜把透气孔遮盖，保持湿度。3d后揭膜通气。然后分常规光照 (2800lx)和强光照(8000lx) 两组处理。强光照处理在玻璃箱内进行，15d后输入CO2， 具体方法是：钢瓶中的CO2通过流量计进入配气罐与空气混合成3920mg/m³浓度的CO2，启动真空泵，使培养箱内形成负压，CO2便进入培养箱内。输入CO2的时间与光照时间同步进行。培养23d后出瓶。
2 结果与分析
2.1 无糖培养对植株生长的影响
将增殖苗转接到无糖的MS和Hoagland培养基上一周后， 生根率达57.1%和60.5%， 而有糖的仅为4.8%，差异极显著。表明无糖培养可以促进植株尽早生根，生根率高，其中又以低盐培养基Hoagand生根效果好。从试验结果得出：培养23d，除封口膜孔数为0的处理外，无糖培养的生根率均为100%，叶面积1.5cm²以上的叶片数都比有糖培养高。
在试验中还观察到无糖培养所生根系发达，呈白色，而有糖培养根系生长缓慢、根短而稀少、呈黄黑色。由于无糖培养根系发育良好，植株健壮，因此试管苗过渡成活率高。各取MS有糖、MS无糖、Hoagland无糖试管苗各100株在珍珠岩中过渡20d后，过渡成活率分别为78%、95%、91%。无糖培养死苗率低，提高了商品苗的数量，从而降低了生产成本。
2.2 封口膜气体交换面积对植物生长的影响
试验中观察到，不论培养基有糖还是无糖，封口膜无透气孔处理的植株生长势均不如有透气孔的，尤其是无糖无透气孔处理的试管苗质量最差，植株呈水渍状，瘦弱、叶片发黄、生长几乎停止，无利用价值。试验结果得出，2孔的试管苗质量最好，植株健壮，生长茂盛，干重、生根率、叶面积、1.5 cm²以上的叶片数均比0孔和4孔的高。且因培养基水分的蒸发量适中，取苗时瓶内的培养基大约还有15mL左右，能满足试管苗生长。4孔的通气面积大，水分蒸发快，前期植株生长很好，但15d后培养基就开始变干，因而影响植株的进一步生长，到取苗时，约50%的植株失水萎蔫或干死。因此认为2孔的通气面积最适合于植株生长。
2.3 光照强度和CO2对植株生长的影响
从试验中可以看出：8000lx+CO2的处理，叶面积、大叶片数和干重均比2800lx不加CO2的处理高。 例如：同是MS无糖、透气孔为2孔时，8000lx+CO2比2800lx不加CO2的平均每株干重高11.4mg， 每片叶面积大0.89cm²、1.5cm²以上的叶片数多29片。而且强光照加CO2的处理生根率高，株高降低 (由3.04cm降为2.26cm)，植株粗壮，长势好。
2.4 无糖培养的适用性
无糖培养需要增加补充CO2气体的设施和增强光照，表面上看增大了生产成本。但无糖培养污染率低，生根早且生根率高，过渡苗成活率高，生长周期缩短。而且补充CO2气体所增设施并不复杂， 年产10万株试管苗投资千元左右即可。光照只需在0.6m² (1.2m×0.5m)培养面积上再增加2支日光灯管，即4支日光灯管加外白纸反光，把光有效地利用到培养瓶上，光照即可达10000lx。因此，无糖培养总的生产成本低于有糖培养。
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