球根海棠(Begonia tuberhybrida)是秋海棠科,秋海棠属一年生草本植物,原产南美。花大色艳,花型别致,花期约为三个多月,是一珍贵花卉。
本文通过组织培养方法来解决球根海棠种子后代分离现象及无性繁殖速度慢等问题。
1 材料和方法
1.1外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
选用球根海棠的嫩叶作为外植体。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
将叶片用自来水冲洗30分钟后,先用75%酒精浸15秒,冲洗后放入0.1%升汞中灭菌2分钟,再用无菌水冲洗3-4次,在无菌条件下,将叶缘切去并将叶片切成约5平方毫米的小块。
1.13 培养条件
培养温度20-24℃,光照时间为8-10小时/天,光照强度1200-1500lx。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
将处理后的外植体,接种在诱导培养基上(配方见文末,下同),约7天,在叶的切口处出现淡黄色半透明的愈伤组织,诱导分化21-28天,可诱导出大量丛生芽,在配方中添加腺嘌呤能促使诱导。
2.2 继代增殖培养
在愈伤组织上形成的丛生芽,切割转接到继代增殖培养基上,增殖系数可达40,且丛生芽整齐、健壮。
2.3 生根培养
当继代后的瓶苗长到2-3厘米高时,可移入生根培养基,8天左右就开始生根,生根率达100%
2.4 炼苗移栽
当小苗转入生根培养基上,根长到约2厘米,同时又有新根形成时即可进行移栽。移栽后首先打开瓶盖,放在室温下,空气温度不低于70%,炼苗4-5天后可移入腐质土中。
移栽时注意将苗上的培养基冲洗干净,放在温度不高于28℃,空气湿度不低于80%的条件下,移栽成活率可达90%以上,且夏季移栽比冬季成活率高。
3 结论
球根海棠组织培养技术的成功无疑为解决其后代变异分离现象和加快其繁殖,提供了一条新的途径,它即可保持优良品种的特性,又能扩大繁殖系数,使少量优质的材料在短期内迅速增殖,获得较好的经济效益。
附配方:
诱导培养基:MS + 6-BA 1mg/L + NAA 0.2mg/L + Ade 5mg/L
增殖培养基:MS + 6-BA 0.1mg/L+ NAA 0.01mg/L
生根培养基:1/2MS + IAA 0.8mg/L
以上配方均含0.7%琼脂和3%蔗糖,pH5.6-5.7。
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