大花重瓣非洲紫罗兰组培技术实例附配方

非洲紫罗兰（Saintpquliaionantha）又名非洲堇，为双子叶植物纲苦苣苔科非洲紫罗兰属的多年生长常绿草本。

本文以非洲紫罗兰的嫩叶片为外植体，用MS固体培养基为基础，添加不同的生长素和细胞分裂素诱导嫩叶分化愈伤组织，并对诱导不定芽、继代增殖、不定根诱导培养基进行了筛选。为实现大花、重瓣型非洲紫罗兰组织培养商品化生产生产提供技术平台。

1材料与方法

1.1 外植体材料及培养条件

1.1.1 外植体选择

本文采用非洲紫罗兰紫色品种，选择生长健壮、无病虫害的植株作为试材，采取其上部嫩叶作为外植体。

1.1.2 材料预处理及消毒

将幼嫩叶片用饱和洗涤液浸泡5-10分钟，自来水冲洗15-20分钟，除去表面污物，沥净水分，超净工作台上用75%的酒精浸润20-30秒，无菌水冲洗1次，再用浓度0.1%的升汞溶液消毒5-6分钟，无菌水冲洗3-5次，充分去除残留的升汞，沥净水分。

1.1.3 培养条件

培养温度(23±2)℃，光照时间16小时/天，光照强度1500lx。

2 结果与分析

2.1 初代诱导培养

将处理好的幼嫩叶片中部切成0.5-1平方厘米的小块，叶片腹面向上放置，接种在愈伤组织诱导培养基上。接种10天后，部分分化培养基上的叶片从切口处开始膨大，20天后，叶片表面出现褶皱，30天切口处产生少量黄绿色愈伤组织，40天后愈伤组织黄绿色特征明显，并伴有绿色小芽点出现。

2.2 继代增殖培养

将愈伤组织切成3-5厘米的小方块接种于分化培养基中进行继代培养，培养30天左右，继续将分化出的丛生芽继代到分化培养基上培养。

2.3 生根培养

将3-4厘米左右生长健壮的的试管苗移至生根培养基中进行生根培养，生根率可达93.7%以上，根生长势旺、健壮。

3 讨论

利用组织培养技术对大花、重瓣型非洲紫罗兰进行快繁，可以使繁殖系数增至几千倍，为花卉市场及大规模生产解决种源问题。

有资料表明，非洲紫罗兰可在MS + 6-BA 0.1mg/L + NAA 0.1mg/L的配方中一次成苗，本试验采用一次性生根培养基1/2MS + 6-BA 0.05mg/L + NAA 0.05mg/L进行一次生根试验，生根率较高，试管苗长势好，但是生根时间较长，根系偏红色，有待于进一步研究。

附配方

诱导培养基：MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L

增殖培养基：MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.5mg/L

生根培养基：1/2MS + NAA 0.1mg/L或IBA 0.1mg/L