金盛球Echinopsis calochlora种仙人球为仙人掌科仙人球属多年生常绿草本植物,本文以金盛球为材料对仙人球进行组织培养技术的研究以期通过试管繁殖途径达到复壮、快繁的目的。
1材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
本文采用金盛球的幼球作为外植体。
1.1.2 材料预处理及消毒
将幼球用刷子蘸少量洗衣粉在自来水下洗净表面,滤纸吸干,切除带根的底部在无菌的条件下,先用75%酒精浸泡15秒,然后置于0.1%升汞溶液中处理10-12分钟,最后用无菌水冲洗5-6次。
1.1.3 培养条件
培养温度(27±2)℃,光照时间10-12小时/天,光照强度1500lx-2000lx。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
将处理好的小球切成长0.5-1.0厘米带2-3行刺座的茎段,接种在愈伤组织诱导培养基上。7天后,均从切口处产生雪花状白色发亮的愈伤组织。
继续培养20天后,在外植体的疣突处相继萌生小球,某些紧贴在培养基上萌生的优势小球又能直接产生数量不等的小球体。
2.2 继代增殖培养
当在外植体上分化的小球直径达0.5-1厘米时,将其单个切下,稍切除顶部后转入增殖培养基。
经过35天的培养,每个培养体可获得4-8个丛生状的小球体;在切口处分化出几倍体积于原培养体的愈伤组织。
2.3 生根培养
当增殖的小球继续培养到直径0.5-1.0厘米时,把单球从丛生球中切下,转入生根培养基上培养约15天后开始有锥状突起。
继续培养20天后,长出数量不等长的约1.0-2.0厘米粗壮的根。
同时,球体继续生长当直径约时1.5厘米时,即可移栽成活。
2.4 练苗移栽或嫁接
将达到移栽标准的生根苗从培养瓶中取出,洗去附着的培养基,于干燥处或培养室条件下放置1-2天,然后再植入河沙60%腐质土20%草炭土20%混合的培养土,严格控制浇水以免水分过多烂根。
另外也可嫁接于事先准备好的量天尺上,苗的成活率较高生长也较快。
附配方
诱导培养基:MS + 6-BA 8mg/L + KT 1mg/L + NAA 0.1mg/L
增殖培养基:MS + 6-BA 3.5mg/L + KT 0.5mg/L + NAA 0.1mg/L
生根培养基:1/2MS + NAA 0.1mg/L + IBA 0.1mg/L + 活性炭 0.5%
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