三色堇（Viola tricolor L.）是堇菜科堇菜属多年生草本花卉，常作二年生栽培，是花坛常用花卉之一。
本项研究针对三色堇组培过程中的关键环节进行了研究，以期为三色堇的种质资源保存、新品种工厂化繁殖推广及遗传转化奠定基础。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
三色堇品种大花黄(B1H)，选择生长健壮、无病虫害的植株作为试材，采取其幼嫩的顶芽作为外植体。
1.1.2 材料预处理及消毒
幼嫩的顶芽采集后，先用清水冲洗干净。在无菌室内用70％酒精消毒15秒，再用0.1％升汞（HgCl2）消毒5分钟，无菌水反复冲洗5-6次。
1.1.3 培养条件
培养温度(23±2)℃，光照时间16小时/天，光照强度2000lx。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
将处理好的外植体接种诱导培养基后，顶芽生长很快。14天后从原来的1.5厘米长高到4-5厘米，生长比较健壮，顶部的叶片随之长大，不断有新叶长出。
2.2 继代增殖培养
将初代培养的顶芽切下接入继代增殖培养基，大约10天后分化出侧枝。侧枝生长很快，10天侧枝能长高2厘米，30天后就能长满整个三角瓶。
2.3 生根培养
将增殖培养后的无根苗接种到生根培养基，从试验过程来看，三色堇生根较困难，需要时间较长，至少30天才能看到少许根长出。
3 讨论
对多数一、二年生草花来说，以幼嫩的组织和器官最好。本研究的结果显示，三色堇幼嫩的顶芽是比较容易组培成功的外植体。
本研究也表明在生根培养方面还有不足之处，有待改进以期获得更好的快繁效率。
附配方
诱导培养基：MS + 6-BA 2mg/L + NAA 0.2mg/L
增殖培养基：MS + 6-BA 1mg/L + NAA 0.02mg/L
生根培养基：1/2MS + NAA 0.1mg/L
以上配方均含3%蔗糖和0.7%琼脂，pH值5.8-6.0。
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