红掌(花烛)组培快繁技术实例含配方

康倍斯
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2022年6月6日16:05:47 评论 813
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本文以红掌的幼嫩叶柄为外植体,对其建立植株再生及快速繁殖体系。

红掌(花烛)组培快繁技术实例

红掌(Anthurium andraeanum)又名安祖花、大叶花烛,为天南星科红掌属多年附生长绿草本植物,原产于中、南美洲等地区的热带雨林中。

本文以红掌的幼嫩叶柄为外植体,对其建立植株再生体系。

1 材料与方法

1.1 外植体材料及培养条件

1.1.1 外植体选择

选择红变色期(即新生叶展开后约2周)的幼嫩叶柄作为外植体。

1.1.2 材料预处理及灭菌

将材料用流水冲洗10分钟左右,移至超净工作台上于无菌环境下用75%酒精浸泡10秒,无菌水冲洗3-5次,再用0.1%的升汞溶液灭菌6-8分钟,无菌水漂洗3-5次后,剪切成0.5-1厘米小段。

1.1.3 培养条件

诱导培养基:MS + 6-BA 2.0mg/L + 2,4-D 0.2mg/L

芽分化及增殖培养基:MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.25mg/L

生根培养基:MS + NAA 0.5mg/L

以上配方均含3%蔗糖和0.7%琼脂,pH5.8-6.0。

培养温度(26±2)℃,光照强度1000-2000lx,光照时长10-14小时/天。

2 方法与结果

2.1 初代诱导培养

将处理好的材料水平接种到培养基上,然后置于(26±2)℃的黑暗环境中培养。不同品种愈伤诱导难易程度有着明显的差异,一般需要40-60天。

2.2 芽分化诱导

愈伤组织生长至直径约0.5厘米左右时,切下并转接到不定芽分化诱导培养基上,培养20-30天,愈伤组织会由黄色转为黄绿色,随后愈伤表面出现许多不规则状小突起,在继续培养30-60天,甚至更长的时间,部分突起由黄绿色变为绿色,然后形成丛生状不定芽。

2.3 继代增殖培养

将红掌丛生芽按其自然生长状态分割成基部带愈伤组织的单芽,转接于新的分化增殖培养基内进行不定芽的分化和增殖培养,培养条件与丛生芽诱导培养相同。

2.4 生根移栽

不定芽生长至2.5-4厘米、具有4-5片叶时,自底部切下并转接到生根诱导培养基,进行生根培养。在适宜条件下培养2周开始生根,5周后不定根数量可达3-5条。生根培养的小植株不能过于矮小、纤细,否则虽能生根,但移栽不易成活或成活后生长不良。

2.5 炼苗移栽

红掌再生植株苗高3-4cm、不定根长2cm以上时进行移栽。移栽前需要进行炼苗,具体做法是:将瓶苗直接从组培室移入外界环境炼苗4-7天,再解开封口膜,在瓶中加入少量水,再继续炼苗3-5天。

炼苗后选择大小一致、具2-3片以上叶片、3-5条根的长势健壮苗,从瓶内将其轻轻夹出,洗净根部的培养基(注意不要伤到根系也叶片),然后栽植与事先配制并灭菌的混合基质(以草炭、水苔、珍珠岩为原料,按1:2:1的比例配制而成)上。

移栽后,用塑料薄膜覆盖,保持相对湿度为80%-90%,温度维持在25-32℃,遮光75%的条件下缓苗1周。之后可开始通风,并逐渐增大风口,2周后完全揭开薄膜,但应注意遮光,经常喷水以维持较高的空气湿度。

移栽后的前10天浇清水,以后每3天喷施EC值为0.8的MS营养液进行营养供给。经过1个月左右的管理,待小苗长出3片以上新叶后,即可进行上盆或定植。

康倍斯
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