植物组培快繁的成功与否,除培养材料本身因素外,在很大程度上取决于对培养基的选择。培养基的种类和成分直接影响到培养材料的生长分化,故应根据培养植物的种类和部位,选择适宜的培养基。
培养基(medium)是培养物生长分化的基质,一般由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等几类物质组成。
1 培养基的种类
1.1 基本培养基和完全培养基
根据其组成,通常分为基本培养基和完全培养基。基本培养基仅含大量元素、微量元素、维生素、氨基酸、糖及水;而完全培养基是在基本培养基的基础上根据不同的培养要求,添加各种植物生长调节物质及附加物。
1.2 固体培养基和液体培养基
在配制培养基时,若加入适量的凝固剂(琼脂)则成为固定培养基;如果不加凝固剂,则为液体培养基。由于固体培养基使用简便,目前使用最为普遍。
1.3 基本培养基的种类及特点
基本培养基的种类非常多,但是较为常用的还是一二十种,如:MS、改良MS、White、改良White、B5、Nitsch、Blaydes、N6、H、VW、改良VW、MT、NT、SH、BL、ER、LS、WS等基本培养基(限于篇幅,需要常用培养基配方表的可以再后台留言)。
基本培养基种类很多,而且各有各的特点和适用范围,下面讲讲最常见的几种基本培养基的特点:
MS培养基是由Murashige和Skoog为培养烟草材料而设计的。其特点是无机盐(如钾盐、铵盐及硝酸盐)的含量和离子浓度均较高,为较稳定的平衡溶液,其养分的数量和比例也较适合,能满足培养物的营养需求。其广泛应用于植物组培快繁,效果良好。
LS(Linsmaier和Skoog)培养基和RM(田中)培养基,其基本成均与MS培养基相同,前者去掉甘氨酸、盐酸吡哆醇和烟酸;后者则把硝酸铵的含量提高到了4950mg/L,把磷酸二氢钾提高到了510mg/L。
White培养基由White为培养番茄根尖而设计的,1963年又作了改良,其特点是无机盐浓度较低,但硫酸镁的浓度却较高。它的使用也较广泛,主要适用于生根培养;无论是用于生根培养还是胚胎培养或一般组织培养都有很好的效果。
B5培养基是由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。它的主要特点是含有较低的铵盐,这可能对于不少培养物的生长有抑制作用,而对有些植物如双子叶植物特别是木本植物,却更适宜。
N6培养基是由我国的朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成本较简单,且硝酸钾和硫酸铵含量高,不含钼。再国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药和花药培养及组织培养等。
SH培养基(Schenk和Hildebrandt)与B5相似,其特点是改硫酸铵为磷酸二氢铵,硝酸钾含量较高,在不少单子叶和双子叶植物上应用,效果很好。
VW(Vacin和Went)培养基适合于气生兰的培养,其特点是总的离子强度稍低;因磷以磷酸钙形式供给,所以要先用1mol/L的盐酸溶解后再加入混合溶液中。
H培养基(Bourgin和Nitsch)其大量元素约为MS培养基的一半,磷酸二氢钾和氯化钙稍低;微量元素种类减少,而其他含量较MS为高;维生素种类比MS多,适用于花药培养。
尼奇培养基(Nitsch)与H培养基成分基本相同,仅生物素比H培养基高10倍,也适用于花药培养。
还有米勒培养基(Miller)和Blaydes培养基二者成分完全相同,适合于大豆愈伤组织培养和花药培养等。
基本培养基的种类很多,在实际生产实践中仍要根据培养物种类和培养目的的不同而选择不同的培养基,其中以MS培养基的应用最为广泛。
评论