植物生长调节剂（植物激素）是植物新陈代谢中产生的天然化合物，不同的植物激素对植物外植体生长和分化作用不同，如生长素类物质2,4-D或NAA常用来诱导外植体产生愈伤组织，IAA和IBA能促进不定根的发生，细胞分裂素类物质主要作用是诱导不定芽发生等。同种植物激素使用的浓度不同，起的作用也有变化，如玉米素在低浓度时，能诱导胚状体发生，若浓度较高，则促进芽的发生。
在组织培养中，使什么样的植物激素以及使用浓度要根据培养目的来确定，也要考虑培养的对象。例如当要诱导愈伤组织生根时，以生长素IBA为好；促进其不定芽的发生，则使用细胞分裂素类物质。
在培养基的各成分中，植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性的作用。
1 生长素类
在组织培养中，生长素主要被用于诱导愈伤组织形成，诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面，根对生长素最敏感，在极低的浓度下，（0.1-10mg/L）就可促进生长，其次是茎和芽。
IAA（吲哚乙酸）是天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的副作用小高温高压易被破坏，也易被细胞中的IAA分解酶降解，受光也易分解。
NAA（萘乙酸）在组织培养中的启动能力要比IAA高出3-4倍，且由于可大批量人工合成，耐高温高压，不易被分解破坏，所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素相互作用促进芽的增殖和生长。
IBA（吲哚丁酸）是促进发根能力较强的生长调节物质。
2,4-D起动能力比IAA高10倍，特别在促进愈伤组织形成上活力最高，但它强烈抑制芽的形成，影响器官的发育，适宜的用量范围较窄，过量常有毒效应。组培中常用于诱导愈伤组织的初代培养阶段。
生长素配置时可先用少量95%酒精助溶。2,4-D可用0.1mol/L的NaOH或KOH助溶。生长素常配成1mg/ml的母液贮于冰箱中备用。
2 赤霉素
赤霉素有20多种，生理活性及作用的种类、部位、效应等各有不同，培养基中添加的是GA3，主要用于促进幼苗茎的伸长生长，促进不定胚发育成小植株；赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响，当生长素/赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化；此外，赤霉素还用于打破休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发。在一般器官形成后，添加赤霉素可促进器官或胚状体的生长。
赤霉素溶于酒精，配置时可用少量95%酒精助溶。赤霉素不耐热，高压灭菌后将有70%-100%失效，应当采取过滤灭菌法加入。
3 细胞分裂素
细胞分裂素类，这类激素是腺嘌呤的衍生物，包括6-BA、KT、ZT（玉米素）等。其中ZT活性最强，但非常昂贵，常用的是6-BA。
在培养基中添加细胞分裂素有三个作用：1、诱导芽的分化、促进侧芽萌发生长，细胞分裂素与生长素相互作用，当组织内细胞分裂素/生长素比值高时，诱导愈伤组织或器官分化出不定芽。2、促进细胞分裂与扩大。3、抑制根的分化。因此，细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖，而避免在生根时使用。
生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、是长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化，应除去或降低生长素的浓度，或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。
生长调节物质的使用甚微，一般用mg/L表示浓度。在组织培养中生长调节物质的使用浓度，因植物的种类、部位、时期、内源激素的不同而异，一般生长素浓度的使用为0.05-5mg/L，细胞分裂素0.05-10mg/L。
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