如何设计植物组培的培养基配方

康倍斯
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2021年1月11日15:42:35 评论 3,466
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本文主要讲的是培养基配方的设计,培养基配方是贯穿整个组培体系的核心,对于培养基的配方可以说多种多样,不同植物,不同培养阶段都会有针对性的培养基。

如何设计植物组培的培养基配方

本文主要讲的是培养基配方的设计,培养基配方是贯穿整个组培体系的核心,对于培养基的配方可以说多种多样,不同植物,不同培养阶段都会有针对性的培养基。

现阶段培养基配方有三种获取方法,我说说它们的优缺点:

1. 文献查阅。这种获取方法是最简单的,当然也是最不靠谱的,现阶段国内的研发氛围不是很好,所以有很多文献是滥竽充数的,但是在无处获取的情况,文献还是有一定的参考价值的。

如果查阅文献,个人推荐优先查阅外国文献,可信度较高,但需要一定文献阅读功底,然后是国内一些比较靠谱的杂志,例如植物生理学通讯、看文献记得看出处,有些杂志名字少见的就看看作个参考就行了。

最后还有便是硕博士论文,这些靠谱程度还是可以的,主要是内容充实,实验更加细致。

2. 组培企业的配方。如果说最靠谱的配方便是这个了,这些配方基本都是身经百炼的,而且这些配方都是以营利为基准的,所以配方利用程度很高。

但是这些配方都是保密的,只能托一定关系才能得到,而且厂方的配方不是绝对固定的,会随情况而变,还有也可以找相关的高校老师获取,当然需要需要一定的关系了。

3. 自主设计。自己设计的东西一般都比较靠谱,毕竟自己能看到材料的变化。

但是一款培养基的实用程度靠的是时间的积累,需要不停的实验,最后筛选出最好的一款,而且要根据植物以及阶段进行不停的调整,因此自己设计需要更多的耐心和时间。

那么应该如何自主如何设计一款培养基配方?

先写一个培养基配方给大家看看:MS + 蔗糖 30g/L + 琼脂 7g/L + NAA 0.1mg/L + 6-BA 2mg/L pH5.8,这是一款1L装的培养基配方。

我们可以划分为几个部分:基本元素液 + 碳源(蔗糖)+ 培养基凝固剂(琼脂)+ 植物生长调节剂,pH值(一般为5.6-5.8)

了解《培养基成分组成及作用》

设计培养基配方简单概括为:将配方的其中一种进行变动,其余不变,同时要设置一个梯度,根据这个梯度观察植物的变化,那种变化符合生产的要求便是最佳值。

设计首先可以从元素液开始

也就是基本培养基,在建立一个新的试验体系时,一般先由一种已被广泛使用的基本培养基(如MS、B5、N6等)开始。

基本培养基的种类很多,可查看《培养基简介及常见培养基的特点》介绍。

当通过一系列的实验,对这种培养基做了某些定性和定量的较小变动后,即有可能得到一种能满足实验需要的新培养基。

不同的糖分浓度

也可以设计出不同的实验组,不过一般为30g/L,生根培养的时候会减少一些;

最多的是改变植物激素

激素(植物生长调节剂)是培养基设计的主要要点,不同激素及其不同浓度、组合和配比都能对植物产生明显的变化。

设计时,可以先参考一些文献,看看其他人使用什么激素,使用什么浓度梯度,再进行自己的设计。

一般来说想促进分裂便优先考虑细胞分裂素、想促进生根便考虑生长素、想使植物变粗变壮便考虑矮壮素。

设计时还要考虑到激素的组合,植物激素永远不是靠一种激素便能很好的调节的,生长素和细胞分裂素一般都是一起加的。

接着是设计浓度梯度,这时你需要考虑激素的使用浓度范围,例如NAA的使用范围是0.1-1mg/L,6-BA则是1-10mg/L,这种范围可以查看《植物生长调节剂在组培中的作用》

附加物

有些特定的植物组培可能会添加附加物。附加物有很多,例如:土豆、香蕉、椰汁等,任何东西都可以加进去看效果,一般设计时就3个浓度:5%、10%、15%。

以上讲的是改变其中一个因子的试验方法,当然还有双因子试验方法及多因子试验方法,为了提高效率,在多因子的情况下都是采用正交试验

试验处理需要设有一定的重复,以取得可靠的试验数据。一般每个处理(配方)至少接种10瓶,每瓶至少3个培养物。

康倍斯
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